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| 產地 | 上海 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 睿創 |
| 貨號 | RC-P96912O |
| 用途 | 科研實驗 |
| 檢測方法 | 酶聯免疫法 |
| 保質期 | 6個月 |
| 適應物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物 |
| 檢測限 | 詳詢 |
| 數量 | 99 |
| 包裝規格 | 96T/48T |
| 標記物 | HRP標記物 |
| 樣本 | 血清,血漿,唾液,尿液,組織,細胞上清,裂解液等 |
| 應用 | 定性/定量/酶活檢測 |
| 是否進口 | 否 |
人肌細胞增強因子2((MEF2)酶聯免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
20pg/ml-900pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中肌細胞增強因子2((MEF2)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人肌細胞增強因子2((MEF2)水平。用純化的人肌細胞增強因子2((MEF2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肌細胞增強因子2((MEF2)，再與HRP標記的肌細胞增強因子2((MEF2)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過 洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌細胞增強因子2((MEF2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人肌細胞增強因子2((MEF2)濃度。
試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
7 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
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2 |
酶標試劑 |
6ml×1瓶 |
8 |
標準品（1600pg/ml） |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶標包被板 |
12孔×8條 |
9 |
標準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
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4 |
樣品稀釋液 |
6ml×1瓶 |
10 |
說明書 |
1份 |
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5 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2張 |
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6 |
顯色劑B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
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800pg/ml |
5號標準品 |
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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400pg/ml |
4號標準品 |
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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200pg/ml |
3號標準品 |
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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100pg/ml |
2號標準品 |
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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50pg/ml |
1號標準品 |
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍（48T的20倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍（48T的20倍）稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間 控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線， 做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔 孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請 乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
