使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,眾所周知,隨是一種有機催化劑,很少量的酶小口該導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,因此該體需常被稱為配
放大體系。
1.標(biāo)準(zhǔn)品的希釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支.用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24ug/ml-5號標(biāo)準(zhǔn)品:150ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12ug/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品 150ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ug/ml
3號標(biāo)準(zhǔn)品:150ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3ug/ml
2號標(biāo)準(zhǔn)品150ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ug/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品:150ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50ul.待測樣晶孔中先加樣品稀釋液40ul,然后再加待測樣品10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,用干,每孔加滿洗洛液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50u,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50u再加入昂色劑B500經(jīng)經(jīng)質(zhì)源汽勻.37G出光顯色15分鐘
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(比時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值), 測定應(yīng)在加終止液后122分鐘以內(nèi)進行,
